大鲵(Andrias davidianus Blanchard)属大型两栖纲、有尾目、隐鳃鲵科,是国家二级保护动物,有活化石之称。大鲵皮肤腺体主要有粘液腺和颗粒腺两种,粘液腺细胞可释放粘糖蛋白,与水结合后成为黏液,覆盖在上皮游离面,形成了一道天然的防护屏障。
大鲵皮肤颗粒腺体能够分泌一种具有特殊性气味的白色粘液,其成分是含有抗菌肽、糖蛋白等功能复杂多样的药理活性物质,对广普抗菌、抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等起着非常明显的作用。其实早在2015年,就有机构对大鲵皮肤粘液抗肺癌活性成分有所研究了,获得了非常多的研究数据,下面跟我们一起来看看吧!
01 大鲵皮肤粘液组份分析。通过对大鲵皮肤粘液中糖、脂肪、蛋白质主要成分进行检测表明,大鲵粘液中总糖含量为3.69%;粗脂肪含量为4.25%,含11种脂肪酸成分,总氨基酸含量达83.97%,含17种氨基酸成分。
02大鲵粘液糖蛋白的提取分离及纯化。通过对碱提取工艺的各个步骤的考察,并以糖蛋白抗肿瘤生物活性为前提,最后确定了大鲵粘液糖蛋白提取工艺。通过提取得到一种相对比较纯的糖蛋白组分,经SDS蛋白电泳检测,该组分糖蛋白为单一组分,其分子量约为30KDa。
03大鲵粘液糖蛋白组成成分分析。本研究通过高效液相色谱和氨基酸自动分析仪对大鲵粘液糖蛋白的单糖组分和氨基酸组分进行了分析。最终确定大鲵粘液糖蛋白中含有6种单糖组分,其摩尔比为甘露糖(Man):葡萄糖醛(GlcUA):半乳糖醛酸(GalUA):N-乙酰氨基葡萄糖(GlcN):葡萄糖(Glc):半乳糖(Gal) = 1.71:4.12:1.09:1.55:1.01:2.09。04大鲵粘液糖蛋白体外抗肺癌活性研究。通过体外MTT实验检测大鲵粘液糖蛋白对人肺腺癌细胞A549生长有抑制作用。随着培养时间的延长,大鲵粘液糖蛋白对A549细胞的抑制作用明显增大,其抑制作用在一定浓度范围内有时间依赖性。粘液糖蛋白与阳性对照紫杉醇相比较对A549细胞增殖抑制作用差异极显著。
创新点:
① 利用自制大鲵粘液采集器的方法,能够无损伤大鲵皮肤,对其进行粘液采集,为大鲵粘液资源的开发利用提供了原料保证;
④ 首次建立了PMP柱前衍生化高效液相色谱法分析大鲵粘液糖蛋中单糖组分,该方法准确可靠,灵敏度较高,对大鲵皮肤粘液糖蛋白的单糖组分都能得到较好的分离效果。
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